丹参中脂溶性成分提取工艺优选实验
      丹参具有活血祛瘀，凉血水痈，养心安神等作用，临床上用于治疗瘀血阻滞，疮痈肿痛，
热人营血所至高热等症状。其脂溶性成分丹参酮ⅡA为抗菌有效成分之一，对人型结核杆菌H37RV菌株有较强的活性。为充分提取丹参中有效成分，增强其疗效，作者用正交设计法对丹参中脂溶性成分提取工艺进行了优选，报道如下。
1  仪器与试药
      双波长薄层扫描分析仪CS—930型(岛津)；电热恒温水浴箱H.HS214型(江苏省医疗器械厂)；微量进样器10μl(上海安亭微量进样品厂)；丹参酮ⅡA与原儿茶醛对照晶(中国药品生物制品检定所)；硅胶G(青岛海洋化工厂)；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2．1  正交设计
    根据丹参所含成分的理化性质以及文献与预试结果，其影响因素主要有醇浓度、加醇量、提取时间与提取温度等，故以I9(34)进行设计，其因素水平见表1。 
                   表1 丹参醇提工艺正交实验因素水平表
——————————————————————————————————————————
    因素         A温度l~C      B加醇量／倍     C乙醇浓度／％      D提取时间／min
——————————————————————————————————————————
     1              70              6(5)            60               12090)
     2              80              5(4)            70               90(60)
     3              90              4(3)            80               60(30)
——————————————————————————————————————————
注：括号内为第2次提取的加醇量和提取时间
2．2供试液的制备
2．2．1 样品供试液的制备   称取丹参饮片20．0g共27份，分别置圆底烧瓶中，按表1因素水平及表2中搭配顺序进行水浴加热回流提取，每份均提取2次，滤过，合并滤液；每一实验号重复提取3次供用。取上述各滤液的1/20置蒸发皿中，于水浴上蒸干，残留物用甲醇少量多次溶解，转移至5ml量瓶中定容，静置备用。 ·
2．2．2 对照品溶液的制备  精密称取丹参酮ⅡA对照品，用甲醇溶解制成0．5mg·ml¯¹浓度的对照品溶液。
2．3丹参酮llA含量测定
     根据样品供试液颜色深浅的不同，精密吸取3-10μl，对照品溶液5-lOμl分别点在同一块硅胶G薄层板上，以石油醚(60-90℃)—醋酸乙酯(8 ：2)为展开剂，展开(预先饱和15min)，取出，晾干。以双波长反射法锯齿扫描(λs450nm，λR700nm，SX=3)进行含量测定，以外标两点法计算出各提取液中丹参酮ⅡA含量，结果见表2。
                    表2 丹参酮ⅡA及浸出物测定结果
————————————————————————————
  实验号              丹参酮ⅡA               浸出物 ％
——————————————————————————————
     1                 0．237                   31．8
     2                 0．483                   18．6
     3                 0．735                   31. 2
     4                 0．345                   22．8
     5                 0．561                   35．7
     6                 0．333                   28．8
     7                 1．047                   37．3
     8                 0．270                   21．6
     9                 0．573                   32．1
——————————————————————————————                                   对表2数据按文献进行方差分析，结果表明以因素C对其影响最显著，其次为A因素，A，B，C，D4因素P均<0．01，影响因素顺序为C>A>D>B，最佳搭配为A3B3C3D2；浸出物以因素C对其影响最显著，P<0．01，其次为B，D因素P<0．05，影响因素顺序为C>D>B>A，最佳搭配为A3B3C3Dl。
3 3讨论与小结
     丹参酮ⅡA在氯仿中易溶，故开始残留物用氯仿溶解，其效果反而不佳，改用甲醇后，也许是其溶解范围更广、渗透力更强等原因，使被包裹在浸膏中的成分更易溶出。因而供试品的颜色较氯仿溶解者为深，其含量也高些，故最后确定以甲醇溶解残留物。
     因中药为多成分作用的结果，故另测浸出物量，以此作为评价提取条件优劣的指标之一，使设计更全面、结果更可靠。
     从统计结果看，丹参中脂溶性成分提取最佳工艺为A3B1GD2，即90℃，11倍量，80％乙醇提取90 min。

摘自《国内植物提取物最新提取工艺汇编》